乳酸脱氫酶測定方法
我們知道,現實生活中存在着各種各樣的的酶,這些酶可以單獨作用,也可以相互作用,對我們的人體產生很大的影響,但是相信大家對於酶的測定方法還不是很熟悉吧,不同酶的測定有不同的方式方法,而且方式方法也種類不一,現如今乳酸脱氫酶測定方法成為很多人研究的領域話題,那麼到底該如何測定呢,下面就讓我們一起來了解一下乳酸脱氫酶測定方法吧。
方法:
實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時儘量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測範圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,餘孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加於酶標板孔底部,儘量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩幹,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配製,輕輕混勻,在使用前一小時內配製),37℃,60分鐘。
3. 温育60分鐘後,棄去孔內液體,甩幹,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩幹。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 温育60分鐘後,棄去孔內液體,甩幹,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩幹。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,後3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應儘量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到後應儘快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液後15分鐘以內進行檢測。
以上內容為我們介紹了乳酸脱氫酶測定方法,我相信這些內容可以引起大家的興趣,我相信大家可以有效的最快的直接的測定出乳酸脱氫酶,可能你也是一個研究愛好者,那就趕快去實踐一翻吧!
-
先用美白牙貼還是先刷牙?美白牙貼可以貼着睡覺嗎
美白牙貼是比較常見的一種牙齒護理產品,它使用起來比較方便,直接貼在牙齒上面就可以了,可以起到很不錯的美白效果,深受人們喜歡。美白牙貼一般會有長短之分,通常長的要貼在上面,短的貼在下面,一定不要貼反了。下面,就快和本站一起了解相關知識吧!本文目錄1、先用美白牙...
-
地圖舌加舌裂紋是脾胃不好嗎 裂紋舌和地圖舌的區別
地圖舌是比較尷尬的一件事情,因為長期地圖舌會導致脾胃不太好,而且還容易引起口角炎等問題。接下來,讓我們來看看本站帶來的裂紋舌和地圖舌的區別介紹吧!全文目錄1、地圖舌加舌裂紋是脾胃不好嗎2、裂紋舌和地圖舌的區別3、地圖舌是什麼原因引起的地圖舌加舌裂紋是...
-
南瓜子的熱量(南瓜子的熱量高嗎吃了會增肥嗎)
生的南瓜子一百克是多少熱量?南瓜子的熱量:576大卡(100克)1.南瓜子具有很好的殺滅血吸蟲幼蟲的作用,對於已經成熟的成蟲,也能使其變性和蟲數減少.對於血吸蟲病也有一定的治療作用;2.南瓜子也是有效的驅絛蟲劑,且沒有毒性和任何副作用,適宜老人、兒童絛蟲病和腹痛脹滿...
-
心律失常需要住院嗎?心律不齊是心跳快還是慢
心律失常並不是必須得注意的,有些偶發性的心律失常是不需要住院的,這種和心情壓力有關係,後期調理就可以慢慢康復,而如果是比較嚴重的心律失常那就需要進行住院觀察了。下面,就快和本站一起了解相關知識吧!本文目錄1、心律失常需要住院嗎?2、心律不齊是心跳快還是慢3...