分離色素的方法有哪些
色素大家應該都很熟悉,很多東西中都會存在色素,比如蔬菜中、食物中,衣物中等等。有的色素對我們來説是有好處的,比如蔬菜。但是有些色素的存在對我們來説是有害的,比如衣物中等。而這種東西卻不是我們能用肉眼看見或者分別出來的,也有很多的辦法是可以將這些色素進行分離的,那麼,下面讓我們一起來了解一下分離色素的方法。
葉綠體中含有綠色素(包括葉綠素a和葉綠素b)和黃色素(包括胡蘿蔔素和葉黃素)兩大類。它們與類囊體膜相結合成為色素蛋白複合體。這兩類色素都不溶於水,而溶於有機溶劑,故可用乙醇、丙酮等有機溶劑提取。提取液可用色譜分析的原理加以分離。因吸附劑對不同物質的吸附力不同,當用適當的溶劑推動時,混合物中各種成分在兩相(固定相和流動相)間具有不同的分配係數,所以移動速度不同,經過一定時間層析後,可將各種色素分開。
實驗步驟
1. 葉綠體色素的提取
1)取新鮮菠菜葉片4~5片(2g左右),洗淨,擦乾,去掉中脈剪碎,放入研缽中。
2)研缽中加2~3ml 95%乙醇,加入少許石英砂、碳酸鈣粉末,研磨至糊狀,再加10~15ml 95%乙醇,提取35min,上清液過濾於三角瓶中,殘渣用10ml 95%乙醇沖洗,一同濾於三角瓶中。
3)如無新鮮葉片,也可用事先制好的葉乾粉提取。取新鮮葉片(以菠菜葉最好),先用105℃殺青,再在80℃下烘乾,研成粉末,密閉貯存。用時稱葉粉2g放入小燒杯中,加95%乙醇20~30ml浸提,並隨時攪動。待乙醇呈深綠色時,濾出浸提液備用。
2. 葉綠體色素的分離:
1)取圓形定性濾紙一張(直徑11cm),在其中心戳一圓形小孔(直徑約2mm)另取一張濾紙條(5cm×1.5cm),用滴管吸取乙醇葉綠體色素提取液沿紙條的長度方向塗在紙條的一邊,使色素擴散的寬度限制在0.5cm以內,風乾後,再重複操作數次,然後沿長度方向捲成紙捻,使浸過葉綠體色素溶液的一側恰在紙捻的一端。
2)將紙捻帶有色素的一端插入圓形濾紙的小孔中,使與濾紙剛剛平齊(勿突出)。
3)在培養皿內放一康維皿,在康維皿中央小室中加入適量的推動劑,把帶有紙捻的圓形濾紙平放在康維皿上,使紙捻下端浸入推動劑中。迅速蓋好培養皿。此時,推動劑藉助毛細管引力順紙捻擴散至圓形濾紙上,並把葉綠體色素向四周推動,不久即可看到各種色素的同心圓環。如無康維皿,也可在培養皿中放入一平底短玻管或塑料藥瓶蓋,以盛裝推動劑。所用培養皿底、蓋直徑應相同,且應略小於濾紙直徑,以便將濾紙架在培養皿邊緣上。
4)當推動劑前沿接近濾紙邊緣時,取出濾紙,風乾,即可看到分離的各種色素:葉綠素a為藍綠色,葉綠素b為黃綠色,葉黃素為鮮黃色,胡蘿蔔素為橙黃色。用鉛筆標出各種色素的位置和名稱。
以上的方法是不是很詳細呢?通過上文的詳述是可以分離色素的,大家可以去試一試。實驗的方法其實還有很多種,大家可以去思考探索一下。很多方法都是別人提供和想出來的,其實在別人的方法當中我們也是可以提煉出來新的方法的。
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