上皮细胞是什么
人体的细胞有很多,不同的细胞在作用上都是不同的,因此对细胞也是需要进行全面认识,这样的人体细胞出现问题的时候,都知道它对人体健康有着怎么样的损害,人体各部位的喜欢是不一样的,而且数量上也是不同,那上皮细胞是什么呢,在这个问题上也是很多人不太清楚的。
很多人低上皮细胞是什么并不了解,对这类问题都是可以进行详细咨询,使得对上皮细胞培养的时候,都是知道该选择什么样的方法最佳,同时不会损害自身健康。
上皮细胞是什么:
上皮细胞培养
1)表皮细胞培养
1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1平方厘米小块。
处理:先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。
3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。
4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。
5.温消化:取出表皮单独处理,用剪刀剪成更小的块后,置入新的0.25%胰蛋白酶中,37℃再消化30~60分钟。
6.用吸管轻轻反复吹打,使成细胞悬液。
7.培养液:通过80目不锈钢纱网滤过后,低速离心,吸上清,直接加入Eagle液和20%小牛血清,制成细胞悬液,接种入碟皿中,CO2温箱培养。
2)乳腺组织培养
直接培养法:(适于培养含纤维少的软组织)
1.在含有少量培养液或Hanks液的容器中,用锋利刀片将组织反复切割成碎块。
2.把组织碎块连同液体注入离心管中,再补加少许培养液,用吸管吹打片刻,置试管架3~5分钟。吸除上层液可排除非乳腺细胞部分。重复2~3次。
3.末次处理结束后,向沉降管中再补加培养液,用吸管稍吹打,使沉降物重悬。不待细胞团块下降立即通过3~4层无菌纱布滤入另管中。
4.调整好适宜密度,接种入培养瓶中培养。
胶原酶消化法:(适于处理含纤维多的较硬组织)
其过程与培养其它组织相同。
3)胃上皮细胞培养
1.取材:取胃溃疡或胃癌手术切除胃标本远端非病变区粘膜少许。
2.清洗:用含庆大霉素(400微克/毫升)和二性霉素(2微克/毫升的Hanks)液漂洗后,用钝器剥离下粘膜,剪成1mm3大小。
3.消化:在I型胶原酶和透明质酸酶中,于37℃中消化80分钟。
4.离心:收集细胞悬液,800转/分离心后,Hanks液漂洗两次。
5.接种:末次离心后加入含有1%~2%胎牛血清的完全培养基,接种入不同孔数的培养板中,接种量依不同实验目的而定。
4)肝细胞培养
初代组织块培养:取新鲜肝脏,先剥除被膜和血管等纤维成分,用刀或剪刀把肝脏剪成1mm3左右的小块,采用帖壁培养法。
5)内皮细胞培养
1.取产后的新鲜脐带。如不立即培养可以保存于4℃中,但不宜超过12小时。无菌剪取长10~15厘米一段。其它如胚胎和幼体动物的大血管,亦可用于培养。
2.先用三通注射器吸温PBS液注入脐带的静脉中,洗除残血,注入口处宜用线绳结扎,以防液体返流。
3.用血管钳夹紧脐带一端,从另端向脐静脉中徐徐注入最终浓度为0.1%的胶原酶,待末端出现液体后结扎之,令充满血管,注入口亦应结扎,以防液体返流,消化3~10分钟。
4.吸出含有内皮细胞的消化液,注入离心管中,为获取更多细胞,可再注入温PBS冲洗2~3次彻底清除干净残余细胞,一并注入离心管中离心。
5.吸除上清,加1640培养液,制成细胞悬液,接种入瓶皿中培养,顺利时2~3天内细胞即可长成单层。
通过以上介绍,对上皮细胞是什么呢,也是有着一些介绍,上皮细胞培养的方法是什么呢,都是有着详细说明,不过在对它培养的时候,不能强行进行,要根据自身需求进行选择,这样对人体各方面,才会有很好的帮助。
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